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NGX6對(duì)Wnt/Beta-catenin信號(hào)傳導(dǎo)通路下游靶分子的影響及其與Wnt
畢業(yè)論文
| 全部作者： | 劉芬 沈守榮 王曉艷 李宏韜 彭婭 廖曼甜 郭勤 劉劼 |
| 第1作者單位： | 中南大學(xué)湘雅3醫(yī)院消化內(nèi)科 |
| 論文摘要： | 目的：（1）探討NGX6基因?qū)Y(jié)腸癌Wnt/Beta-catenin信號(hào)傳導(dǎo)通路下游靶分子的影響，明確NGX6對(duì)Wnt/Beta-catenin信號(hào)傳導(dǎo)通路是否存在抑制作用。（2）阻斷Wnt通路對(duì)NGX6轉(zhuǎn)錄水平表達(dá)的影響，明確NGX6與Wnt通路之間是否存在反饋調(diào)節(jié)。方法：（1）將pCMV-myc-NGX6真核表達(dá)載體及pCMV-myc空白載體瞬時(shí)轉(zhuǎn)染結(jié)腸癌細(xì)胞系SW620，采用Western-blot的方法檢測(cè)轉(zhuǎn)染NGX6前后Wnt/Beta-catenin信號(hào)傳導(dǎo)通路下游靶分子c-jun, c-myc, cyclinD1的表達(dá)。（2）構(gòu)建LEF1缺失突變體（缺乏N-末端β-catenin binding domain）pcDNA3.1(+)-LEF1DN瞬時(shí)轉(zhuǎn)染SW620細(xì)胞，阻斷Wnt通路，并通過(guò)Western-blot及TCF-4熒光素酶報(bào)告質(zhì)粒檢測(cè)的方法確定阻斷的效果.(3)通過(guò)RT-PCR檢測(cè)Wnt通路阻斷后NGX6的表達(dá)改變情況，判斷Wnt通路與NGX6之間是否存在反饋調(diào)節(jié)作用。結(jié)果：(1) NGX6基因瞬時(shí)轉(zhuǎn)染結(jié)腸癌細(xì)胞系SW620后,可以明顯下調(diào)Wnt/Beta-catenin信號(hào)傳導(dǎo)通路下游靶分子c-jun, c-myc, cyclinD1的表達(dá).(2)成功構(gòu)建真核表達(dá)載體pcDNA3.1(+)-LEF1DN, Western-blot及TCF-4熒光素酶報(bào)告質(zhì)粒均證實(shí)pcDNA3.1(+)-LEF1DN對(duì)Wnt通路具有阻斷作用（3）瞬時(shí)轉(zhuǎn)染pcDNA3.1(+)-LEF1DN抑制Wnt通路后，NGX6在轉(zhuǎn)錄水平的表達(dá)有上升。結(jié)論：（1）NGX6對(duì)Wnt/Beta-catenin信號(hào)傳導(dǎo)通路下游靶分子具有負(fù)性調(diào)節(jié)作用。（2）阻斷Wnt通路對(duì)NGX6的表達(dá)有影響，Wnt通路與NGX6之間可能存在反饋調(diào)節(jié)作用。 |
| 關(guān)鍵詞： | NGX6基因; 結(jié)腸癌; 信號(hào)傳導(dǎo); Wnt/beta-catenin 遠(yuǎn)程下載 論文(免費(fèi)PDF論文全文) |
| 發(fā)表日期： | 2007年12月19日 |
| 同行評(píng)議： | （暫時(shí)沒(méi)有） |
| 綜合評(píng)價(jià)： | （暫時(shí)沒(méi)有） |
| 修改稿： |
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