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談蜂房提取物對荷瘤鼠放化療的增效作用
摘要： 目的： 觀察蜂房乙醇提取物對荷H22肝癌小鼠的放化療增效作用。方法： 移植H22肝癌的小鼠模型，給予蜂房乙醇提取物與化療和放療聯(lián)合，計(jì)算抑瘤率及增效率。結(jié)果： 蜂房乙醇提取物對荷H22肝癌小鼠放化療的抑瘤率分別達(dá)60.5%和61.2%，增效率分別為33.3%和32.6%。結(jié)論： 蜂房乙醇提取物對荷H22肝癌小鼠的放化療均有明顯的增效作用。
關(guān)鍵詞： 肝腫瘤，實(shí)驗(yàn)性； 小鼠； 蜂房提取物； H22肝癌
蜂房是具有抗菌、抗炎、抗病毒、抗?jié)儭⒖鼓[瘤及免疫調(diào)節(jié)等多種藥理作用的中藥［1］。有研究表明，蜂房及其提取物對胃癌、肝癌、子宮頸癌等多種腫瘤細(xì)胞的體外生長均有抑制作用［2］。前期研究表明蜂房乙醇提取物對小鼠S180實(shí)體瘤及艾氏腹水癌的體內(nèi)生長也有明顯的抑制作用（另文待發(fā)表）。2006年9月～2007年7月進(jìn)一步研究了蜂房乙醇提取物對荷H22肝癌小鼠放化療的增效作用。
1 材料與方法
1.1 蜂房提取物的制備
稱取蜂房（購于天益堂藥房）100 g，用600 ml 85%乙醇浸泡后加熱回流3 h，濾過；藥渣再用400 ml 85%乙醇加熱回流3 h，濾過，合并濾液，減壓濃縮成清膏5.7 g，冰箱保存。使用前用生理鹽水配成0.048 g/ml、0.024 g/ml和0.012 g/ml 3個(gè)濃度，相當(dāng)于生藥的濃度分別為0.84 g/ml、0.42 g/ml和0.21 g/ml。
1.2 實(shí)驗(yàn)材料
昆明種小鼠由中國醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動物中心提供（合格證號：遼實(shí)動字第521號），體重（20±2）g，雌雄各半。H22肝癌瘤株由北京中科院藥物研究所提供。5-氟尿嘧啶（5-FU）針劑（天津力生藥廠生產(chǎn)，批號：051006），用前用生理鹽水稀釋成1 g/L。LMR-1.5/AL 日本東芝醫(yī)用電子直線加速器。
1.3 蜂房提取物對H22荷瘤小鼠化療的作用
在無菌條件下抽取生長良好的H22肝癌小鼠的瘤液，用生理鹽水稀釋成2×107個(gè)/ml的細(xì)胞懸液，0.2 ml/只，小鼠后肢皮下接種。于瘤株接種后第2天將小鼠隨機(jī)分為7組，每組10只。對照組：25 ml/kg生理鹽水；5-FU組：0.01 g/kg；低劑量組：蜂房提取物0.3 g/kg；中劑量組：蜂房提取物0.6 g/kg；高劑量組：蜂房提取物1.2 g/kg；5-FU加中劑量組：5-FU 0.01 g/kg加蜂房提取物0.6 g/kg；5-FU加高劑量組：5-FU 0.01 g/kg加蜂房提取物1.2 g/kg。對照組和5-FU組灌胃給予生理鹽水，其余各組灌胃給相應(yīng)劑量蜂房提取物，每日1次，連續(xù)15 d。除對照組和低、中、高劑量組外，于給藥同時(shí)腹腔注射5-FU，每日1次，連續(xù)3 d，停藥1 d，再連續(xù)給藥2 d（其余各組同法給予生理鹽水）。于第16天處死小鼠，取瘤稱重，計(jì)算抑瘤率和增效率［3］。
1.4 蜂房提取物對H22荷瘤小鼠放療作用
于瘤株接種后第2天將小鼠隨機(jī)分為4組，每組10只。對照組：生理鹽水；放療組：8、9、10 Gy；放療加中劑量組：放療8、9、10 Gy，蜂房提取物0.6 g/kg；放療加高劑量組：放療8、9、10 Gy，蜂房提取物1.2 g/kg。后兩組灌胃給藥，每日1次，連續(xù)15 d（前兩組給生理鹽水）。除對照組外于給藥第7天開始加放射治療（電子線）。基礎(chǔ)量8 Gy/d，每日1次，連續(xù)3 d，劑量遞增，8、9、10 Gy。于第16天處死小鼠，取瘤稱重，計(jì)算抑瘤率和增效率［3］。
1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法
實(shí)驗(yàn)結(jié)果采用t檢驗(yàn)作統(tǒng)計(jì)分析。
2 結(jié)果
2.1 蜂房提取物對H22荷瘤小鼠化療的增效作用中、高劑量蜂房提取物對小鼠H22肝癌的生長均有明顯抑制作用，抑瘤率為34.8%和38.4%，與對照組比較差異具有顯著性（P＜0.05）。中、高劑量蜂房提取物對小鼠H22肝癌的5-FU治療均有增效作用，增效率分別為24.3%和32.6%。高劑量蜂房提取物增效顯著，與5-FU組比較P＜0.05，見表1。表1 蜂房提取物對H22荷瘤小鼠化療的增效作用（略）
2.2 蜂房提取物對H22荷瘤小鼠放療的增效作用中、高劑量蜂房提取物對小鼠H22肝癌的化療均有增效作用，增效率分別為12.3%和33.3%。與對照組比較，放療聯(lián)合給藥組抑瘤率差異顯著（P＜0.01），見表2。表2 蜂房提取物對H22荷瘤小鼠放療的增效作用（略）
3 討論
中藥蜂房用于治療腫瘤早有記載［4］。傳統(tǒng)的用藥方法多為水煎服或外用，而且具有一定的毒副作用，因此，提取其抗腫瘤的有效成分成為中藥開發(fā)的方向。蜂房的化學(xué)成分十分復(fù)雜，利用不同溶劑所得到的蜂房提取物也顯示了不同的藥理作用［1］。國內(nèi)外的研究表明，蜂房的主要成分蜂膠對人肝癌、口腔癌、子宮頸癌、乳腺癌、胸腺癌、結(jié)腸腺癌及皮
膚癌等多種細(xì)胞株的生長都有抑制作用［5,6］。有人對蜂膠提取物抗腫瘤作用機(jī)制的研究結(jié)果表明，蜂膠的乙醇提取物能提高荷S180肉瘤小鼠的免疫系統(tǒng)活性［7］。目前對于蜂房抗腫瘤作用研究也多限于體外，蜂房乙醇提取物對活體腫瘤的抑制作用報(bào)道很少［8］。前期研究工作表明，蜂房的85%乙醇提取物對小鼠S180實(shí)體瘤和艾氏腹水癌均有較好的抑制作用。
本文用蜂房的85%乙醇提取物對H22肝癌荷瘤鼠進(jìn)行了放化療增效作用的研究，結(jié)果表明，蜂房提取物的1.2 g/kg、0.6 g/kg 2個(gè)劑量組與空白對照組相比，使H22肝癌小鼠的腫瘤重量顯著降低（P＜0.05），抑瘤率達(dá)38.4%，且有劑量依賴關(guān)系。使5-FU化療及電子線放療的H22肝癌小鼠的腫瘤重量降低非常顯著（P＜0.001），抑瘤率分別達(dá)61.2%和60.5%，增效率分別達(dá)32.6%和33.3%。說明蜂房乙醇提取物對H22肝癌荷瘤小鼠的放化療有顯著的增效作用。這可為進(jìn)一步深入研究及藥物開發(fā)所需的臨床試驗(yàn)提供科學(xué)依據(jù)。
【參考文獻(xiàn)】
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［3］徐淑云，卞如廉，陳修.藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)方法學(xué)［M］.北京：人民衛(wèi)生出版社，1994：1432－1440.
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