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口腔執(zhí)業(yè)助理醫(yī)師考點(diǎn)：基因工程基本原理
基因工程(genetic engineering)又稱基因拼接技術(shù)和DNA重組技術(shù)，是以分子遺傳學(xué)為理論基礎(chǔ)，以分子生物學(xué)和微生物學(xué)的現(xiàn)代方法為手段，將不同來源的基因按預(yù)先設(shè)計(jì)的藍(lán)圖，在體外構(gòu)建雜種DNA分子，然后導(dǎo)入活細(xì)胞，以改變生物原有的遺傳特性、獲得新品種、生產(chǎn)新產(chǎn)品。基因工程技術(shù)為基因的結(jié)構(gòu)和功能的研究提供了有力的手段。下面YJBYS小編就來具體說說基因工程基本原理吧。
基因工程根基事理一個(gè)完整的基因克隆過程應(yīng)搜羅目的基因的獲取，克隆基因載體的選擇與刷新，目的基因與載體的毗連，重組DNA分子導(dǎo)入受體細(xì)胞，篩選出含感樂趣基因的重組DNA轉(zhuǎn)化細(xì)胞。實(shí)現(xiàn)上述過程需要一些主要的工具酶，如限制性內(nèi)切核酸酶毗連酶等。限制性內(nèi)切核酸酶是一類識(shí)別DNA特意序列的內(nèi)切核酸酶。
�、倌康幕虻墨@取外源基因又稱目的基因，來歷于幾種路子化學(xué)合成、酶促合成cDNA，制備的基因組DNA及PCR手藝。細(xì)菌質(zhì)粒、噬菌體和一些病毒DNA均可被刷新成基因克隆的載體。
�、诨蜉d體的選擇與構(gòu)建可作為基因載體的DNA分子有質(zhì)粒DNA、噬菌體DNA和病毒DNA，它們經(jīng)恰當(dāng)刷新后仍具有自我復(fù)制能力，或兼有表達(dá)外源基因的能力。
�、弁庠椿蚺c載體的毗連毗連體例有黏性結(jié)尾毗連、平端毗連和人工接頭毗連等。
④重組DNA導(dǎo)入宿主細(xì)胞外源DNA與載體在體外毗連成重組DNA分子，需將其導(dǎo)入宿主細(xì)胞。隨受體細(xì)胞發(fā)展、增殖，重組DNA分子得以復(fù)制、擴(kuò)增。
�、葜亟M體的篩選剖斷哪一菌落或嗜菌斑所含重組DNA分子確實(shí)帶有目的基因，即可獲得目的基因的克隆，這一過程即為篩選或選擇。
⑥克隆基因的表達(dá)在原核或真核表達(dá)系統(tǒng)中進(jìn)行表達(dá)，獲得所需要的卵白質(zhì)。
例題(單選)在分子生物學(xué)規(guī)模中，分子克隆主若是指
A.DNA的年夜量復(fù)制 B.DNA的年夜量剪切 C.RNA的年夜量復(fù)制 D.RNA的年夜量剪切 E.反轉(zhuǎn)錄酶
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