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臨床執(zhí)業(yè)醫(yī)師助理考點：革蘭氏染色法概述
細菌先經(jīng)堿性染料結(jié)晶紫染色，而經(jīng)碘液媒染后，用酒精脫色，在一定條件下有的細菌紫色不被脫去，有的可被脫去，因此可把細菌分為兩大類，前者叫做革蘭氏陽性菌(G+)，后者為革蘭氏陰性菌(G-)。為觀察方便，脫色后再用一種紅色染料如堿性蕃紅、稀釋復紅等進行復染。陽性菌仍帶紫色，陰性菌則被染上紅色。有芽胞的桿菌和絕大多數(shù)的球菌，以及所有的放線菌和真菌都呈革蘭氏正反應;弧菌，螺旋體和大多數(shù)致病性的無芽胞桿菌都呈現(xiàn)負反應。
在治療上，大多數(shù)革蘭氏陽性菌都對青霉素敏感(結(jié)核桿菌對青霉素不敏感);而革蘭氏陰性菌則對青霉素不敏感(但奈瑟氏菌中的流行性腦膜炎雙球菌和淋病雙球菌對青霉素敏感)，而對鏈霉素、氯霉素等敏感。所以首先區(qū)分病原菌是革蘭氏陽性菌還是陰性菌，在選擇抗生素方面意義重大。
革蘭氏陽性菌和革蘭氏陰性菌在化學組成和生理性質(zhì)上有很多差別，染色反應不一樣。現(xiàn)在一般認為革蘭氏陽性菌體內(nèi)含有特殊的核蛋白質(zhì)鎂鹽與多糖的復合物，它與碘和結(jié)晶紫的復合物結(jié)合很牢，不易脫色，陰性菌復合物結(jié)合程度底，吸附染料差，易脫色，這是染色反應的主要依據(jù)。另外，陽性菌菌體等電點較陰性菌為低，在相同PH條件下進行染色，陽性菌吸附堿性染料很多，因此不易脫去，陰性菌則相反。所以染色時的條件要嚴格控制。例如，在強堿的條件下進行染色，兩類菌吸附堿性染料都多，都可呈正反應;PH很低時，則可都呈負反應。此外，兩類菌的細胞壁等對結(jié)晶紫—碘復合物的通透性也不一致，陽性菌透性小，故不易被脫色，陰性菌透性大，易脫色。所以脫色時間，脫色方法也應嚴格控制。
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