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背根節初級感覺神經元的溫度敏感性
作者：張磊，王玉英，董輝，胡三覺【關鍵詞】 溫度敏感性；膜片鉗術；神經節,脊；神經元
【Abstract】 AIM: To study the effects of temperature on mediumdiameter primary sensory neurons in rat dorsal root ganglion (DRG). METHODS: Wholecell patchclamp recording was performed on mediumdiameter DRG neurons freshly isolated from rats for observing the firing characteristics by temperature gradient stimulation. RESULTS: According to the firing characteristics of the primary sensory medium neurons to the temperature changes in rat DRG, there were 2 classes of cells: In class Ⅰ, the medium neuron was temperaturesensitive neuron. Allornone action potentials could be generated and the number of spikes and the frequency decreased with increase of the temperature, and vice versa. The coldsensitive neuron was voltage dependent. In class Ⅱ, the medium neuron was temperatureinsensitive neuron. It only had single action potential with increase or decrease of the temperature, and the amplitude of the single action potential decreased with increase of the temperature. CONCLUSION: The two classes of rat DRG medium neurons have different thermosensitivity.
【Keywords】 thermosensitivity; patchclamp techniques; ganglia, spinal; neurons
【摘要】 目的： 觀察大鼠背根節 (DRG) 中型神經元的溫度敏感性. 方法： 在新鮮分散的大鼠背根節中型神經元運用全細胞膜片鉗技術，觀察給予不同溫度梯度刺激下引起細胞放電的特征. 結果： 根據大鼠背根節中型神經元在不同溫度梯度刺激下的放電特征可將它們區分為兩類溫度敏感神經元. Ⅰ類神經元的溫度敏感性與冷溫度變化密切相關，隨著溫度的升高而引發的逐漸增強的膜電位超級化可引發頻率由高到低的動作電位. 隨著溫度的降低神經元又表現出頻率由低到高的動作電位變化. 動作電位的幅值一致，符合“全或無”定律. 該類神經元具有電壓依賴性. Ⅱ類神經元的興奮性與溫度變化的關系不明顯，隨著溫度升高或降低，神經元只出現一個動作電位，其頻率沒有變化，僅僅表現在隨溫度升高，動作電位的幅值降低，溫度降低后，其幅值又恢復. 結論： 大鼠DRG兩類神經元在溫度變化一致的情況下各具不同的冷溫度敏感性.
【關鍵詞】 溫度敏感性；膜片鉗術；神經節,脊；神經元
0引言
為了生存和適應自然界各種變化, 溫度感受是動物最基本的生物行為. 動物通過特殊的溫度感受器來感知冷和熱. 依據細胞所具有不同的冷熱溫度感受器，可簡單將其溫度敏感性分為三類. 這種分類在神經系統具有一定的普遍性［1-2］. 背根節 (dorsal root ganglion, DRG) 是外周感受信號傳向中樞所經的第一站，節內細胞復雜多樣，其中中、小型細胞傳遞的信息和冷熱覺的關系密切. 目前關于背根節小細胞和冷溫度敏感性關系的研究報道較多［3-5］，但有關中型細胞和溫度感受及傳遞關系的研究較少. 本研究采用全細胞膜片鉗方法初步探討背根節上中型神經元的溫度敏感性，旨在深入了解初級感覺神經元在溫度感受與傳遞中的作用機制.
1材料和方法
1.1材料SD大鼠體質量50~60 g，雌雄不拘，由第四軍醫大學實驗動物中心提供； 胰蛋白酶 (Ⅰ型)，膠原酶 (Ⅲ型)，MgATP均購自美國Sigma公司；Axon200A放大器，美國Axon公司；半導體溫度計 (7151型)，上海醫用儀表廠.
1.2方法急性分離DRG細胞后，進行全細胞膜片鉗記錄. 實驗在40個DRG細胞上進行記錄，靜息膜電位為：(-52.0±3.2) mV．
1.2.1DRG細胞的制備SD大鼠在戊巴比妥鈉 (40 mg/kg, ip) 麻醉下，迅速取出胸腰段DRG，置于氧飽和的RPMI 1640液中，仔細剪除多余的神經纖維后將神經節置于含酶的RPMI 1640液中 (
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